衛辦應急發〔２００８〕１８號 各省、自治區、直轄市衛生廳局，新疆生產建設兵團衛生局： 近年來，我國部分地區首次出現人粒細胞無形體病疫情。為了提高醫務人員對人粒細胞無形體病的認識，加強醫療機構的預防控制工作，規范病例診斷與報告、標本采集與檢測、疫情控制與應急處置等方面的工作，我部組織專家制定了《人粒細胞無形體病預防控制技術指南（試行）》。現印發給你們，請遵照執行。 二○○八年二月十九日 人粒細胞無形體病預防控制技術指南 （試行） 人粒細胞無形體病（Human granulocytic anaplasmosis，HGA）是由嗜吞噬細胞無形體（Anaplasma phagocytophilum，曾稱為“人粒細胞埃立克體，Human granulocytic ehrlichiae”）侵染人末梢血中性粒細胞引起，以發熱伴白細胞、血小板減少和多臟器功能損害為主要臨床表現的蜱傳疾病。自1994年美國報告首例人粒細胞無形體病病例以來，近年來美國每年報告的病例約600~800人。2006年，我國在安徽省發現人粒細胞無形體病病例，其他部分省份也有疑似病例發生。該病臨床癥狀與某些病毒性疾病相似，容易發生誤診，嚴重者可導致死亡。為指導臨床醫生和疾病預防控制專業人員做好該病的發現、報告、診斷、治療、個人防護、實驗室檢測和疫情防控與應急處置工作，加強公眾健康教育，制定本技術指南。 一、目的 （一）指導各級醫療機構正確開展人粒細胞無形體病的診斷和治療，及時報告病例并做好個人防護和院內感染的控制工作。 （二）指導各級疾病預防控制機構開展人粒細胞無形體病流行病學調查、實驗室檢測和疫情監測控制工作。 （三）指導各地開展人粒細胞無形體病流行病學、病原學及防控策略的研究。 （四）指導各地做好預防人粒細胞無形體病的健康教育工作。 二、疾病概述 （一）病原學。 嗜吞噬細胞無形體屬于立克次體目、無形體科、無形體屬。無形體科是一類主要感染白細胞的專性細胞內寄生革蘭陰性小球桿菌，其中對人致病的病原體主要包括無形體屬（Anaplasma）的嗜吞噬細胞無形體、埃立克體屬(Ehrlichia)的查菲埃立克體（E. chaffeensis）和埃文氏埃立克體（E.ewingii）、新立克次體屬(Neorickettsia)的腺熱新立克次體（N. sennetsu），分別引起人粒細胞無形體病、人單核細胞埃立克體病(Human monocytic ehrlichiosis, HME)、埃文氏埃立克體感染、腺熱新立克次體病。 90年代初期，美國在多例急性發熱病人的中性粒細胞胞質內發現埃立克體樣包涵體。1995年，Goodman等從病人的血標本分離到該種嗜粒細胞病原體，將它非正式命名為人粒細胞埃立克體，其所致疾病稱為人粒細胞埃立克體病。后經16S rRNA基因序列的系統發育分析，發現該種嗜粒細胞病原體與無形體屬最相關，因此，將其歸于無形體屬的一個新種，命名為嗜吞噬細胞無形體，其所致疾病也改稱為人粒細胞無形體病。 1. 形態結構及培養特性 嗜吞噬細胞無形體呈球狀多型性，革蘭氏染色陰性，主要寄生在粒細胞的胞質空泡內，以膜包裹的包涵體形式繁殖。用Giemsa法染色，嗜吞噬細胞無形體包涵體在胞質內染成紫色，呈桑葚狀（圖-1）。 嗜吞噬細胞無形體為專性細胞內寄生菌，缺乏經典糖代謝途徑，依賴宿主酶系統進行代謝及生長繁殖，主要侵染人中性粒細胞。嗜吞噬細胞無形體的體外分離培養使用人粒細胞白血病細胞系（HL-60），主要存在于HL-60細胞內與膜結構相連的空泡內，生長繁殖迅速。其感染的空泡內無查菲埃立克體感染所形成的纖維樣結構。嗜吞噬細胞無形體早期的形態多為圓形、密度較大的網狀體，后期菌體變小且密度增大。嗜吞噬細胞無形體的外膜比查菲埃立克體外膜有更多的皺折（圖-2）。 圖1 人血液中性粒細胞內無形體包涵體(X1000, JS Dumler) 圖2 電鏡下的無形體包涵體(X21960, JS Dumler) 2. 遺傳及表型特征 嗜吞噬細胞無形體的基因組為1,471,282個堿基對，G+C含量為41.6%，含有1,369個編碼框（ORF）。特征性基因為msp2以及AnkA基因，100%的菌株具有msp2，70%的菌株具有AnkA基因。 （二）流行病學。 1. 宿主動物與傳播媒介 動物宿主持續感染是病原體維持自然循環的基本條件。國外報道，嗜吞噬細胞無形體的儲存宿主包括白足鼠等野鼠類以及其他動物。在歐洲，紅鹿、牛、山羊均可持續感染嗜吞噬細胞無形體。 國外報道，嗜吞噬細胞無形體的傳播媒介主要是硬蜱屬的某些種（如肩突硬蜱、篦子硬蜱等）。我國曾在黑龍江、內蒙古及新疆等地的全溝硬蜱中檢測到嗜吞噬細胞無形體核酸。 我國的儲存宿主、媒介種類及其分布尚需做進一步調查。 2. 傳播途徑 （1）主要通過蜱叮咬傳播。蜱叮咬攜帶病原體的宿主動物后，再叮咬人時，病原體可隨之進入人體引起發病。 （2）直接接觸危重病人或帶菌動物的血液等體液，有可能會導致傳播，但具體傳播機制尚需進一步研究證實。國外曾有屠宰場工人因接觸鹿血經傷口感染該病的報道。 3. 人群易感性 人對嗜吞噬細胞無形體普遍易感，各年齡組均可感染發病。 高危人群主要為接觸蜱等傳播媒介的人群，如疫源地（主要為森林、丘陵地區）的居民、勞動者及旅游者等。與人粒細胞無形體病危重患者密切接觸、直接接觸病人血液等體液的醫務人員或其陪護者，如不注意防護，也有感染的可能。 4. 地理分布和發病季節特點 目前，已報道有人粒細胞無形體病的國家有美國、斯洛文尼亞、法國、英國、德國、澳大利亞、意大利及韓國等，但僅美國和斯洛文尼亞分離到病原體。根據國外研究，該病與萊姆病的地區分布相似，我國萊姆病流行區亦應關注此病。 該病全年均有發病，發病高峰為5-10月。不同國家的報道略有差異，多集中在當地蜱活動較為活躍的月份。 （三）主要病理改變及臨床表現。 病理改變包括多臟器周圍血管淋巴組織炎癥浸潤、壞死性肝炎、脾及淋巴結單核吞噬系統增生等，主要與免疫損傷有關。嗜吞噬細胞無形體感染中性粒細胞后，可影響宿主細胞基因轉錄、細胞凋亡，細胞因子產生紊亂、吞噬功能缺陷，進而造成免疫病理損傷。 潛伏期一般為7-14天（平均9天）。急性起病，主要癥狀為發熱、全身不適、乏力、頭痛、肌肉酸痛，以及惡心、嘔吐、厭食、腹瀉等。實驗室檢查外周血象白細胞、血小板降低，肝酶升高。嚴重者可發展為多臟器功能衰竭、彌漫性血管內凝血，甚至死亡。老年患者及免疫缺陷患者感染本病后病情多較危重。 三、診斷、治療和報告 醫療機構應按照《人粒細胞無形體病診療方案（試行）》（附件1）做好診斷和治療。同時，應加強醫務人員的個人防護和院內感染控制工作。 各級醫療機構發現符合病例定義的人粒細胞無形體病疑似、臨床診斷或確診病例時，應參照乙、丙類傳染病的報告要求于24小時內通過國家疾病監測信息報告管理系統進行網絡直報，報告疾病類別選擇“其它傳染病”。符合《國家突發公共衛生事件相關信息報告管理工作規范（試行）》要求的，按照相應的規定進行報告。 四、實驗室檢測 各級疾病預防控制機構專業人員和臨床醫務人員發現疑似病例時，應認真按照《人粒細胞無形體病實驗室檢測方案（試行）》（附件3）進行標本的采集、包裝、運送和實驗室檢測。省級實驗室無檢測條件或無法鑒定時，應將原始標本及病原分離物送中國疾病預防控制中心進行檢測。 五、流行病學調查 疾病預防控制機構接到疫情報告后，應按照《人粒細胞無形體病流行病學調查方案（試行）》（附件2），立即組織專業人員開展流行病學調查，追溯可能的感染來源，調查傳播途徑及相關影響因素，填寫《人粒細胞無形體病個案調查表》（見附件2附表）。 出現聚集性病例時，應開展病例的主動搜索，并通過對傳染源、傳播途徑、傳播媒介及相關影響因素等的調查分析，及時提出有針對性的預防控制措施。 六、專題調查 有條件的地區，疾病預防控制機構可根據當地疫情的特點，參照《人粒細胞無形體病專題調查方案（試行）》（附件4），組織開展人群血清流行病學、宿主動物和傳播媒介等方面的專題調查。 七、預防控制措施 （一）做好公眾預防的指導和健康教育。 避免蜱叮咬是降低感染風險的主要措施。預防該病的主要策略是指導公眾、特別是高危人群減少或避免蜱的暴露。有蜱叮咬史或野外活動史者，一旦出現疑似癥狀或體征，應及早就醫，并告知醫生相關暴露史。 蜱主要棲息在草地、樹林等環境中，應盡量避免在此類環境中長時間坐臥。如需進入此類地區，尤其是已發現過病人的地區，應注意做好個人防護，穿著緊口、淺色、光滑的長袖衣服，可防止蜱的附著或叮咬，且容易發現附著的蜱。也可在暴露的皮膚和衣服上噴涂避蚊胺（DEET）等驅避劑進行防護。在蜱棲息地活動時或活動后，應仔細檢查身體上有無蜱附著。蜱常附著在人體的頭皮、腰部、腋窩、腹股溝及腳踝下方等部位。如發現蜱附著在身體上，應立即用鑷子等工具將蜱除去。因蜱體上或皮膚破損處的液體可能含有傳染性病原體，不要直接用手將蜱摘除或用手指將蜱捏碎。 蜱可寄生在家畜或寵物的體表。如發現動物體表有蜱寄生時，應減少與動物的接觸，避免被蜱叮咬。 （二）開展醫療衛生專業人員培訓。 各地應開展對醫務人員和疾控人員的培訓工作，提高醫務人員發現、識別人粒細胞無形體病的能力，規范其治療行為，以降低病死率；提高疾控人員的流行病學調查和疫情處置能力，控制疫情的蔓延和流行。 （三）提高實驗室診斷能力。 發現疑似病例時，應及時采集標本開展實驗室檢測。各省級疾病預防控制中心應逐步提高對該病的實驗室檢測能力，建立實驗室檢測的相關技術和方法。已發生或可能發生疫情的地區及有條件的地市級疾病預防控制中心和醫療機構也應逐步建立該病的實驗室診斷能力。 （四）媒介與宿主動物的控制。 出現暴發疫情時，應采取滅殺蜱、鼠和環境清理等措施，降低環境中蜱和鼠的密度。 （五）病人的管理。 對病人的血液、分泌物、排泄物及被其污染的環境和物品，應進行消毒處理。一般不需要對病人實施隔離。 附件：1. 人粒細胞無形體病診療方案（試行） 2. 人粒細胞無形體病流行病學調查方案（試行） 3. 人粒細胞無形體病實驗室檢測方案（試行） 4. 人粒細胞無形體病專題調查方案（試行） 附件1 人粒細胞無形體病診療方案 （試行） 為指導各地及時、有效地開展人粒細胞無形體病的診斷和救治工作，減少危重和死亡病例，防止院內感染的發生，特制定本方案。 一、臨床表現 潛伏期一般為7-14天（平均9天）。急性起病，主要癥狀為發熱（多為持續性高熱，可高達40℃以上）、全身不適、乏力、頭痛、肌肉酸痛，以及惡心、嘔吐、厭食、腹瀉等。部分患者伴有咳嗽、咽痛。體格檢查可見表情淡漠，相對緩脈，少數病人可有淺表淋巴結腫大及皮疹。可伴有心、肝、腎等多臟器功能損害，并出現相應的臨床表現。 重癥患者可有間質性肺炎、肺水腫、急性呼吸窘迫綜合癥以及繼發細菌、病毒及真菌等感染。少數病人可因嚴重的血小板減少及凝血功能異常，出現皮膚、肺、消化道等出血表現，如不及時救治，可因呼吸衰竭、急性腎衰等多臟器功能衰竭以及彌漫性血管內凝血死亡。 老年患者、免疫缺陷患者及進行激素治療者感染本病后病情多較危重。 二、實驗室檢查 實驗室檢查外周血象白細胞、血小板降低，異型淋巴細胞增多。合并臟器損害的患者，心、肝、腎功能檢測異常。病原學和血清學檢查陽性。其中： 血常規：白細胞、血小板減少可作為早期診斷的重要線索。病人發病第一周即表現有白細胞減少，多為1.0-3.0×109/L; 血小板降低，多為30-50×109/L。可見異型淋巴細胞。 尿常規：蛋白尿、血尿、管形尿。 血生化檢查: 肝、腎功能異常；心肌酶譜升高；少數患者出現血淀粉酶、尿淀粉酶和血糖升高。 部分患者凝血酶原時間延長，纖維蛋白原降解產物升高。可有血電解質紊亂，如低鈉、低氯、低鈣等。少數病人還有膽紅素及血清蛋白降低。 三、并發癥 如延誤治療，患者可出現機會性感染、敗血癥、中毒性休克、中毒性心肌炎、急性腎衰、呼吸窘迫綜合癥、彌漫性血管內凝血及多臟器功能衰竭等，直接影響病情和預后。 四、病例診斷 依據流行病學史、臨床表現和實驗室檢測結果進行診斷。 （一）流行病學史。 1. 發病前2周內有被蜱叮咬史; 2. 在有蜱活動的丘陵、山區（林區）工作或生活史; 3. 直接接觸過危重患者的血液等體液。 （二）臨床表現。 急性起病，主要癥狀為發熱（多為持續性高熱，可高達40℃以上）、全身不適、乏力、頭痛、肌肉酸痛，以及惡心、嘔吐、厭食、腹瀉等。個別重癥病例可出現皮膚瘀斑、出血，伴多臟器損傷、彌漫性血管內凝血等。 （三）實驗室檢測。 1. 血常規及生化檢查 （1）早期外周血象白細胞、血小板降低，嚴重者呈進行性減少，異型淋巴細胞增多。 （2）末梢血涂片鏡檢中性粒細胞內可見桑葚狀包涵體。 （3）谷丙（丙氨酸氨基轉移酶，ALT）和/或谷草（天冬氨酸氨基轉移酶，AST）轉氨酶升高。 2. 血清及病原學檢測 （1）急性期血清間接免疫熒光抗體（IFA）檢測嗜吞噬細胞無形體IgM抗體陽性。 （2）急性期血清IFA檢測嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性。 （3）恢復期血清IFA檢測嗜吞噬細胞無形體IgG抗體滴度較急性期有4倍及以上升高。 （4）全血或血細胞標本PCR檢測嗜吞噬細胞無形體特異性核酸陽性，且序列分析證實與嗜吞噬細胞無形體的同源性達99%以上。 （5）分離到病原體。 （四）診斷標準。 疑似病例：具有上述（一）、（二）項和（三）項1項中的（1）、（3）。部分病例可能無法獲得明確的流行病學史。 臨床診斷病例：疑似病例同時具備（三）項1項中的（2），或（三）項2項中的（1）或（2）。 確診病例：疑似病例或臨床診斷病例同時具備（三）項2項中（3）、（4）、（5）中的任一項。 五、鑒別診斷 （一）與其他蜱傳疾病、立克次體病的鑒別：人單核細胞埃立克體病（HME）、斑疹傷寒、恙蟲病、斑點熱以及萊姆病等。 （二）與發熱、出血及酶學指標升高的感染性疾病的鑒別：主要是病毒性出血性疾病，如流行性出血熱、登革熱等。 （三）與發熱、血白細胞、血小板降低的胃腸道疾病的鑒別：傷寒、急性胃腸炎、病毒性肝炎。 （四）與發熱及血白細胞、血小板降低或有出血傾向的內科疾病的鑒別：主要是血液系統疾病，如血小板減少性紫癜，粒細胞減少、骨髓異常增生綜合征。可通過骨髓穿刺及相應病原體檢測進行鑒別。 （五）與發熱伴多項酶學指標升高的內科疾病鑒別：主要是免疫系統疾病，如皮肌炎、系統性紅斑狼瘡、風濕熱。可通過自身抗體等免疫學指標進行鑒別。 （六）其他：如支原體感染、鉤端螺旋體病、鼠咬熱、藥物反應等。 六、治療 及早使用抗生素，避免出現并發癥。對疑似病例可進行經驗性治療。一般慎用激素類藥物，以免加重病情。 （一）病原治療。 1. 四環素類抗生素 （1）強力霉素。為首選藥物，應早期、足量使用。成人口服：0.1g/次, １日２次, 必要時首劑可加倍。８歲以上兒童常用量：首劑４mg/kg；之后，每次２mg/kg, １日２次。一般病例口服即可，重癥患者可考慮靜脈給藥。 （2）四環素。口服：成人常用量為0.25-0.5g/次，每6小時1次；8歲以上兒童常用量為一日25-50 mg/kg，分4次服用。靜脈滴注：成人一日1-1.5g，分2-3次給藥；8歲以上兒童為一日10-20 mg/kg，分2次給藥，每日劑量不超過1g。住院患者主張靜脈給藥。四環素毒副作用較多，孕婦和兒童慎用。 強力霉素或四環素治療療程不少于7天。一般用至退熱后至少3天，或白細胞及血小板計數回升，各種酶學指標基本正常，癥狀完全改善。早期使用強力霉素或四環素等藥物，一般可在24-48小時內退熱。因人粒細胞無形體病臨床表現無特異性，尚缺乏快速的實驗室診斷方法，可對疑似病例進行經驗性治療，一般用藥3-4天仍不見效者，可考慮排除人粒細胞無形體病的診斷。 2．利福平：兒童、對強力霉素過敏或不宜使用四環素類抗生素者，選用利福平。成人450-600mg，兒童10 mg/kg，每日一次口服。 3．喹諾酮類：如左氧氟沙星等。 磺胺類藥有促進病原體繁殖作用，應禁用。 （二）一般治療。 患者應臥床休息，高熱量、適量維生素、流食或半流食，多飲水，注意口腔衛生，保持皮膚清潔。 對病情較重患者，應補充足夠的液體和電解質，以保持水、電解質和酸堿平衡；體弱或營養不良、低蛋白血癥者可給予胃腸營養、新鮮血漿、白蛋白、丙種球蛋白等治療，以改善全身機能狀態、提高機體抵抗力。 （三）對癥支持治療。 1. 對高熱者可物理降溫，必要時使用藥物退熱。 2. 對有明顯出血者，可輸血小板、血漿。 3. 對合并有彌漫性血管內凝血者，可早期使用肝素。 4. 對粒細胞嚴重低下患者，可用粒細胞集落刺激因子。 5. 對少尿患者，應堿化尿液，注意監測血壓和血容量變化。對足量補液后仍少尿者，可用利尿劑。如出現急性腎衰時，可進行相應處理。 6. 心功能不全者，應絕對臥床休息，可用強心藥、利尿劑控制心衰。 7. 應慎用激素。國外有文獻報道，人粒細胞無形體病患者使用糖皮質激素后可能會加重病情并增強疾病的傳染性，故應慎用。對中毒癥狀明顯的重癥患者，在使用有效抗生素進行治療的情況下，可適當使用糖皮質激素。 （四）隔離及防護。 對于一般病例，按照蟲媒傳染病進行常規防護。在治療或護理危重病人時，尤其病人有出血現象時，醫務人員及陪護人員應加強個人防護。做好病人血液、分泌物、排泄物及其污染環境和物品的消毒處理。 （五）出院標準。 體溫正常、癥狀消失、臨床實驗室檢查指標基本正常或明顯改善后，可出院。 （六）預后。 據國外報道，病死率低于1%。如能及時處理，絕大多數患者預后良好。如出現敗血癥、中毒性休克、中毒性心肌炎、急性腎衰、呼吸窘迫綜合癥、彌漫性血管內凝血及多臟器功能衰竭等嚴重并發癥的患者，易導致死亡。 附件2 人粒細胞無形體病流行病學調查方案 （試行） 為做好人粒細胞無形體病疫情的流行病學調查，準確描述和分析疫情特征，科學制訂防控策略和措施，特制定本方案。 一、調查目的 （一）為病例的核實診斷提供流行病學證據。 （二）為了解該病在我國的流行病學及臨床特征積累數據。 二、調查對象 （一）散發病例：包括疑似病例、臨床診斷病例、實驗室確診病例。 （二）聚集性病例：在同一村莊，或在同一山坡、樹林、茶園、景區等地勞動或旅游的人員中，2周內出現2例及以上人粒細胞無形體病（疑似）病例，或在病例的密切接觸者中出現類似病例。 三、調查內容和方法 （一）個案調查和標本采集。 發現人粒細胞無形體病病例后，應及時開展流行病學個案調查。調查內容包括病例的基本情況、家庭及居住環境、暴露史、發病經過、就診情況、臨床表現、實驗室檢查、診斷、轉歸、密切接觸者情況等（見附表《人粒細胞無形體病個案調查表》），并采集相關標本（見附件3《人粒細胞無形體病實驗室檢測方案（試行）》）。 1. 基本情況 包括年齡、性別、住址、職業、文化程度、旅行史等。 2．臨床資料 通過查閱病歷及化驗記錄、詢問經治醫生及病例、病例家屬等方法，詳細了解病例的發病經過、就診情況、臨床表現、實驗室檢查結果、診斷、治療、疾病進展、轉歸等情況。 3. 病例家庭及居住環境情況 通過詢問及現場調查，了解病例及其家庭成員情況、家庭居住位置、環境、家禽及家畜飼養情況等。 4. 暴露史及病例發病前活動范圍 （1） 詢問病例發病前2周內勞動、旅行或可疑暴露史，了解其是否到過有蜱生長的場所，是否有蜱叮咬史。 （2） 詢問病例發病前2周內與類似病例的接觸情況，包括接觸時間、方式、頻率、地點、接觸時采取的防護措施等。 5. 密切接觸者 如病例出現出血并污染周圍環境、物品時，應對醫務人員、陪護人員或其他密切接觸者開展追蹤調查，必要時應采集相關標本進行檢測。 （二）聚集性病例的調查。 在出現聚集性病例或暴發疫情時，應注意調查感染來源。如懷疑有人傳人可能時，應評估人群感染及人傳人的風險。應組織疾控人員或醫務人員，采用查看當地醫療機構門診日志、住院病歷等臨床資料、入戶調查等方式，開展病例的主動搜索，并對搜索出的疑似病例進行篩查、隨訪。追蹤疑似病例、臨床診斷病例及實驗室確診病例的密切接觸者，必要時采集相關樣本進行檢測。 通過查閱資料、咨詢當地相關部門等方法，了解當地自然生態環境、媒介分布，以及相關的人口、氣象、生產、生活資料等情況。 四、調查要求 （一）調查者及調查對象。 應由經過培訓的縣（區）級疾病預防控制機構專業人員擔任調查員。現場調查時，應盡可能直接對病人進行訪視、詢問。如病人病情較重，或病人已死亡，或其他原因無法直接調查時，可通過其醫生、親友、同事或其他知情者進行調查、核實或補充。 （二）調查時間及調查內容。 應在接到疫情報告后迅速開展流行病學調查，調查內容見附表《人粒細胞無形體病個案調查表》。調查表應填寫完整，實驗室檢測結果、病人轉歸等情況應及時填補到調查表中，以完善相關信息。 （三）調查者的個人防護。 在流行病學調查及標本采集過程中，調查者應采取相應的個人防護措施，尤其應注意避免被蜱叮咬或直接接觸病人的血液、分泌物或排泄物等。 五、調查資料的分析、總結和利用 （一）在疫情調查處理進程中或結束后，應及時對流行病學資料進行整理、分析，撰寫流行病學調查報告，并及時向上級疾病預防控制機構及同級衛生行政部門報告。 （二）疫情調查結束后，各省級疾病預防控制機構應及時將人粒細胞無形體病流行病學個案調查表及流行病學調查報告上報中國疾病預防控制中心。 （三）疫情調查結束后，各地疾病預防控制機構應將流行病學調查的原始資料、分析結果及調查報告及時整理歸檔。 附表 人粒細胞無形體病個案調查表 編碼□□□□□□□□ 1 一般情況 1.1姓名： (14歲以下同時填寫家長姓名 ) 1.2性別： ①男 ②女 □ 1.3出生日期： 年 月 日(若無詳細日期,填寫實足年齡 歲) 1.4職業： (1)幼托兒童 (2)散居兒童 (3)學生 (4)教師 (5)保育員/保姆 (6)餐飲業 (7)公共場所服務業 (8)商業服務業(17)旅游服務業 (9)醫務人員 (13)干部職員 (10)工人 (11)民工 (12)農民 (16)林業 (20)采茶 (21)牧民 (18)狩獵 (19)銷售/加工野生動物 (14)離退人員 (15)家務待業 (22)不詳 (23)其他 □ 1.5工作單位： 1.6現住址： 　省　 　 市（地、州） 縣（市、區） 鄉（鎮、街道） 村（居委會） 組（門牌） 1.7聯系電話： 聯系人： 與患者關系： 2 發病情況 2.1發病時間： 年 月 日 2.2就診情況 就診次數 就診日期 就診醫療機構 診斷 使用抗生素名稱 使用激素名稱 第1次 第2次 第3次 第4次 2.3 現住醫院入院時間： 年 月 日 2.4住院號： 2.5入院診斷： 2.6是否出院：①是 ②否 □ 如已出院： 2.6.1出院診斷： 2.6.2出院時間： 年 月 日 2.7 本次調查時病人情況： ①痊愈 ②好轉 ③惡化 ④死亡 □ 2.8 最后轉歸： ①痊愈 ②死亡 ③其它 □ 3 臨床表現 3.1首發癥狀、體征： 3.2主要癥狀、體征： 3.2.1發熱 最高： ℃ 入院時： ℃ □ 3.2.2畏寒 ①有 ②無 □ 3.2.3頭痛 ①有 ②無 □ 3.2.4頭暈 ①有 ②無 □ 3.2.5乏力 ①有 ②無 □ 3.2.6全身酸痛 ①有 ②無 □ 3.2.7淋巴結腫大①有 ②無 □ 3.2.7.1若有，腫大部位及大小： 3.2.8鞏膜黃染 ①有 ②無 □ 3.2.8.1若有，出現時間： 年 月 日 3.2.9眼結膜充 ①有 ②無 □ 3.2.10皮膚淤點 ①有 ②無 □ 3.2.10.1若有, 出現部位： 3.2.10.2出現時間： 年 月 日 3.2.11皮膚淤斑 ①有 ②無 □ 3.2.11.1若有, 出現部位： 3.2.11.2出現時間： 年 月 日 3.2.12牙齦出血①有 ②無 □ 3.2.13有無皮疹①有 ②無 □ 3.2.13.1若有, 出現部位： 3.2.13.2 皮疹性質： 3.2.13.3出現時間： 年 月 日 3.3 呼吸系統癥狀 3.3.1咳嗽 ①有 ②無 □ 3.3.2咳痰 ①有 ②無 □ 3.3.3咯血 ①有 ②無 □ 3.3.4呼吸困難 ①有 ②無 □ 3.4 消化系統癥狀 3.4.1食欲減退 ①輕度 ②厭食 ③無 □ 3.4.2惡心 ①有 ②無 □ 3.4.3嘔吐 ①有 ②無 □ 3.4.4嘔血 ①有 ②無 □ 3.4.5腹痛 ①有 ②無 □ 3.4.5.1腹痛部位 ①上腹部 ②下腹部 ③其它 □ 3.4.5.2腹痛性質 ①絞痛 ②灼燒樣痛 ③鈍痛 ④壓痛 ⑤其它 □ 3.4.6腹脹 ①有 ②無 □ 3.4.7腹瀉 ①有， 次/天 ②無 □ 3.4.8大便性狀 ①血便　②黑便　③水樣便 ④其它 □ 3.4.9口腔潰瘍 ①有 ②無 □ 3.5 運動系統癥狀 3.5.1關節疼痛 ①有 ②無 □ 3.5.1.1 部位： 3.5.2肌肉疼痛 ①有 ②無 □ 3.5.2.1部位： 3.6 循環系統癥狀 3.6.1心慌 ①有 ②無 □ 3.6.2相對緩脈 ①有 ②無 □ 3.6.3胸悶 ①有 ②無 □ 3.6.4胸痛 ①有 ②無 □ 3.7 泌尿系統癥狀 3.7.1尿急、尿頻①有 ②無 □ 3.7.2腎區疼痛 ①有 ②無 □ 3.8 精神神經癥狀 3.8.1表情淡漠 ①有 ②無 □ 3.8.2煩躁 ①有 ②無 □ 3.8.3抽搐 ①有 ②無 □ 3.8.4昏迷 ①有 ②無 □ 3.9 其它： 4 實驗室檢查 4.1 血常規 序次 檢查日期 WBC(109/L) N(%) L(%) 異型淋巴細胞 PLT(109/L) 檢測單位 4.2 尿常規 序次 檢查日期 尿蛋白 血尿 管型尿 檢測單位 4.3 肝功能 序次 檢查日期 谷丙轉氨酶 谷草轉氨酶 檢測單位 4.4 其它檢測 序次 檢查日期 X－線 腎功能 血糖 出凝血 時間 其他 檢測單位 4.5 血清學和病原學檢查 標本類型 采集時間 檢測時間 檢測方法 檢測結果 檢測單位 5 住院用藥情況（抗生素、激素、生白藥） 用藥名稱 劑量 起始日期 終止日期 6 流行病學調查 6.1 發病前兩周活動史 日期 所到地點 從事活動種類1 頻次 累計停留時間（小時） 暴露方式2 注：1.活動種類（可重復、多選）： ①采茶 ②割草 ③打獵 ④放牧　 ⑤采伐 ⑥旅游 ⑦其它： □ 2.暴露方式：①草地休息 ②草叢、灌木叢行走 ③與動物接觸 ④其它 □ 6.2當地是否有蜱（蜱的當地俗名： ）： ①有 ②無 ③不知道 □ 6.3是否見過蜱（蜱的當地俗名： ）： ①是 ②否 ③不認識 □ 6.3.1若見過，地點： 6.4是否被蜱叮咬過①是 ②否 ③不知道 □ 6.4.1若被叮咬過，時間及次數： ①1個月前，次數 ②1個月內，次數 第一次叮咬時間： 年 月 日 第二次叮咬時間： 年 月 日 6.4.2叮咬部位(可多選)： ①腳 ②腿 ③腹部 ④背部 ⑤頸部 ⑥其他 □ 6.4.3叮咬時有無疼痛感？①有 ②無 □ 6.5發病前兩周有無皮膚破損： ①有 ②無 □ 6.6是否聽說過類似病例： ①是 ②否 □ 6.6.1 若聽說過，病例姓名： 病例具體住址： 6.7發病前是否接觸過類似病人： ①是 ②否 □ 6.7.1 所接觸病人情況 姓名 性別 年齡 現住址 關系 診斷 接觸時間(最早~最晚) 接觸頻次 接觸方式 聯系方式 注：接觸方式(可多選)： ①直接接觸病人血液 ②直接接觸病人分泌物、排泄物 ③救治/護理 ④同處一室 ⑤其它（在表中注明） □ 6.8 飼養與接觸動物情況 動物種類 數量 動物身上是否有蜱附著 發病前2周是否與動物接觸 6.9 患者家庭居住地地理環境描述(地形地貌及附近有無蜱類生長) 6.9.1住宅周圍環境有無雜草灌木生長： ①有 ②無 □ 6.9.2住室內衛生狀況： ①好 ②一般 ③差 □ 6.10病前一個月家中是否發現過老鼠？ ①有 ②無 ③不知道 □ 6.11病前一個月內是否接觸其它野生動物？①是 ②否 ③不知道 □ 如是，接觸時間： 年 月 日 接觸方式： 7. 調查小結： 調查單位： 調查人員簽名： 調查時間： 年 月 日 附件3 人粒細胞無形體病實驗室檢測方案 （試行） 為保證及時、科學地采集、運送人粒細胞無形體病病例（包括疑似病例）及疫源地調查的各種類型標本，規范人粒細胞無形體病的實驗室檢測程序，提高檢測質量，為明確診斷或開展相關的科學研究提供實驗室依據，特制定本方案。 一、樣本采集對象 （一） 人粒細胞無形體病病例（包括疑似病例，以下同）。 （二） 病例密切接觸者或其他健康人群。 （三） 疫源地可疑宿主動物（野生動物及狗、羊、牛等家畜）、媒介蜱。 二、標本種類及采集方法 （一） 抗凝血。 常用EDTA抗凝管或枸櫞酸鹽抗凝管采集血液5ml，用于病原分離。應盡可能在病人使用抗生素前進行血液的采集。 （二）非抗凝血。 用無菌真空管，采集病例、健康人群及宿主動物非抗凝血5ml，用于血清抗體及PCR檢測。采集后，應及時分離血清，將血清、血球分別保存。急性期抗體及PCR檢測用血液采集盡可能在發病后1周內，恢復期抗體檢測標本采集至少間隔2-3周。如第2份血清在1個月之內抗體升高不明顯的，應建議間隔2-4周后采集第3份血液標本。 （三）包涵體檢測血涂片的制備。 采集血液標本后，制作厚血片，進行紅細胞裂解處理等。 （四）媒介蜱標本的采集。 采集動物體表媒介蜱，用鑷子夾取，放入鋪墊有潮濕濾紙或紗布的青霉素小瓶或試管中，用紗布包緊瓶口以防止蜱爬出。實驗室接到蜱標本后，首先應進行種屬鑒定，然后按類別分組（1-5只蜱/組），采用75%酒精浸泡30min后，用無菌蒸餾水反復沖洗3次。最后進行分組研磨，研磨液用于提取DNA，進行PCR擴增。 （五）有條件時，可采集活檢或尸檢標本，冰凍、福爾馬林固定或石蠟包埋后進行實驗室檢測。具體方法參照病理實驗室相關要求和衛生部《傳染病人或疑似傳染病人尸體解剖查驗規定》的相關要求。 三、標本采集和保存注意事項 標本采集應符合無菌操作要求。抗凝血如不能立即床邊接種，應置于4℃環境保存，避免冰凍（不超過2周）。非抗凝血應及時進行無菌分離血清，血清用于抗體檢測，血球部分研磨后提取DNA用于PCR檢測。如不能及時檢測，可暫置于－20℃環境保存。所有標本應置入大小適合、帶螺旋蓋、內有墊圈的凍存管內，擰緊管口。 標本采集后，應認真填寫采樣登記表。 四、實驗室檢測 （一）包涵體的檢測。 1. 血片及白細胞涂片制備 采集的抗凝血標本盡快用血球層推血片，待干燥后冷丙酮固定10min；或提取抗凝血中的白細胞并進行涂片，待干燥后冷丙酮固定10min。 2. 染色 通常采用瑞氏（Wright）染色法、姬氏(Giemsa)染色法及瑞－姬混合染色法。有條件的實驗室，可使用美國CDC推薦的染色方法。 3. 染液配置方法 （1）瑞－姬染液：取瑞氏染料和姬氏染料各0.5 g，以甲醇研溶，加甲醇500ml保存，每天搖勻１次，１周后可使用。 （2）改良Mc Donald法瑞－姬染色劑：75 ml甘油（分析純）中加入磷酸鹽緩沖液（Na2HPO4 1g和KH2PO4 2g），以4 ml蒸餾水溶解，37 ℃水浴24 h溶解混勻，用濾紙過濾，保存于密封的棕色瓶中備用。上述甘油緩沖液1.5 ml加瑞－姬染色劑50 ml，混勻后備用。4. 染色步驟 血推片或白細胞涂片分別以兩種染色劑染色2 min，再加蒸餾水作用5 min，用自來水沖洗。 5. 結果觀察 中性粒細胞中可見桑葚狀包涵體（見圖1），并注意保存相關標本，以便進行復核。 （二）血清學檢測。 常用血清學方法為間接免疫熒光（IFA）法。采集急性期（發熱初期，一般發病1周內）與恢復期（至少間隔2-3周）雙份血清。如恢復期血清抗體檢測陰性，應建議醫生采集第3份血液樣本（間隔2-4周）。 1. 試劑 使用國際推薦的、經過ISO質量認證的產品。 2. 方法及操作按說明書進行。 3. 結果解釋 IFA檢測結果解釋按說明書進行。 如果同時檢測雙份血清，IgG抗體4倍升高，則結果強烈支持嗜吞噬細胞無形體感染。如果急性期抗體升高，而恢復期沒有升高或輕微升高，則應采集第3份血液樣本（間隔2-4周）進行進一步檢測。 （三）嗜粒細胞無形體核酸PCR檢測。 目前，國際推薦使用16S rRNA基因檢測方法，有條件的實驗室，可進一步選用熱休克蛋白基因groEL擴增方法。 1. DNA提取 用急性期、未使用抗生素的EDTA抗凝血或非抗凝血血球部分、白細胞及蜱研磨液提取DNA。最后，以AE緩沖液50μl抽濾以提高回收的DNA濃度。如采用血液白細胞層提取DNA，可明顯提高陽性檢出率。實驗時，應采集當地正常人血液同時提取DNA，作為PCR的陰性對照。 2. PCR擴增 （1）16S rRNA基因檢測：16S rRNA 高度保守，是PCR檢測最常用的擴增靶基因，巢式PCR檢測可提高檢測靈敏度和特異度，采用屬特異及種特異引物同時進行檢測。PCR檢測應分區進行，避免污染。使用引物序列見表1。 表1 巢式PCR檢測無形體及埃立克體16S rRNA基因常用引物 引物名稱 序 列 片段長度(bp) Eh-out1(AF414399) 5’-TTG AGA GTT TGA TCC TGG CTC AGA ACG-3’ 653 Eh-out2(AF414399) 5’-CAC CTC TAC ACT AGG AAT TCC GCT ATC-3’ Eh-gs1(AF414399) 5’-GTA ATA CT GTA TAA TCC CTG-3’ 282 Eh-gs2(AF414399) 5’-GTA CCG TCA TTA TCT TCC CTA-3’ HGA1 5’-GTC GAA CGG ATT ATT CTT TAT AGC TTG -3’ 389 HGA2 5’-TAT AGG TAC CGT CAT TAT CTT CCC TAC-3’ PCR反應混合物的準備按常規進行。第一輪反應采用外引物對Eh-out1和Eh-out2，DNA模板10μl（白細胞提取的DNA可適當減少）。PCR反應體系總體積為25μl或50μl（需要進行PCR測序或克隆時，應適當擴大反應體系），其它成分的濃度按常規進行。反應程序如下： 94℃ 5min 40循環：94℃ 45sec 55℃ 50sec 72℃ 1min 72℃ 總延伸 5min 第二輪反應使用2對引物分別進行巢式PCR。2對引物分別是無形體屬及埃立克體屬通用內引物（Eh-gs1、Eh-gs2）；以及HGA種特異性引物（HGA1及HGA2）。檢測樣本取第一輪產物1-2μl為模板，陽性對照取0.5μl為模板。反應程序同第一輪反應。 （2）熱休克蛋白基因groEL擴增 與groEL基因的應用相比，16S rRNA基因的應用更為廣泛，但groEL基因在不同種屬間具有較大的變異性。因此，對于診斷及菌株的鑒定，groEL基因均具有重要意義。該基因擴增使用巢式PCR，引物序列見表2。 表2 groEL基因擴增常用引物 引物名稱 序 列 退火溫度 片段長度bp) HS1 5’-TGG GCT GGT A（A/C）TGA AAT 52℃ 1431 HS6 5’-CCI CCI GGI ACI A（C/T）ACC TTC HS43 5’-AT（A/T）GC（A/T） AA（G/A）GAA GCA TAG TC 55℃ HGA480 HS45 5’-ACT TCA CG（C/T）（C/T）TCA TAG AC HME528 DNA提取同上。PCR檢測時，反應混合物的準備按常規進行。DNA模板量同16S rRNA基因檢測。巢式PCR第一輪反應采用外引物對HS1及HS6。 反應程序如下： 3循環：94℃ 1min 48℃ 2min 70℃ 90sec 37循環：88℃ 1min 52℃ 2min 70℃ 90sec 68℃ 總延伸 5min 第二輪PCR引物采用HS43及HS45。檢測樣本取第一輪產物1-2μl為模板，陽性對照取0.5μl為模板。反應程序同第一輪反應。反應程序同第一輪反應，但退火溫度由52℃改為55℃。 3．測序及分析 對擴增產物進行測序并進行同源比較，分析當地流行株與其它地區的變異性。 （四）病原體分離培養。 多用HL-60進行嗜吞噬細胞無形體的分離培養。最常用的分離方法是將白細胞部分接種培養基，然后將100-500μl抗凝血接種到懸浮有2×105或1×106細胞內, 每2-3天染色檢查包涵體，一般5-10天可查見包涵體。由于分離可能受到紅細胞的影響，因此，建議使用以下方法： 1.白細胞分離：采用密度梯度離心方法（Ficoll-Paque）。一般采用2-3 ml EDTA抗凝血，用2倍體積的無菌Hanks 平衡鹽溶液稀釋，最后采用Histopaque（Sigma，St . louis, Mo）密度梯度離心分離白細胞，可以獲得較高的白細胞，用以分離HGA。采用白細胞分離方法進行接種時，應注意防止操作過程中的污染。 2. 紅細胞裂解后收集白細胞（NHCl4裂解法）。 3. 在使用含有紅細胞的標本培養后，另加入宿主未感染的細胞，建立混合培養。 血液白細胞懸浮于2ml體積、含有5-10%胎牛血清的培養基中，且在25 cm2培養瓶內與培養細胞作用3小時。37℃、5% CO2 條件下振搖孵育，可增加病原體與細胞的作用。 病原體的鑒定：可通過種特異引物進行PCR鑒定。 五、生物安全 在標本采集、運輸及實驗室工作過程中，生物安全應參照《病原微生物實驗室生物安全管理條例》中的有關要求進行。 （一）實驗室生物安全。 標本滅活、病原DNA標本提取及病原體分離操作應在生物安全Ⅱ級實驗室進行。非感染性材料的檢測可在生物安全I級實驗室進行。 （二）血液標本采集安全注意事項。 采集病例的標本時，應做好個人防護。采集者應戴乳膠手套，盡量避免病例的血液外溢或直接接觸。如發生血液外溢污染環境時，應及時采用75%酒精或常用消毒劑進行消毒處理。應按照對傳染性樣本的要求，對采集標本的器具及病人止血棉球及時進行消毒處理。防止銳器扎傷皮膚，一旦發生，應按臨床外科要求，及時進行傷口清創。如直接沾染了臨床診斷病例或確診病例的血液，除及時消毒皮膚外，應口服強力霉素預防感染，服用劑量參照《人粒細胞無形體病診療方案（試行）》（附件1）。 （三）采集動物宿主與媒介蜱標本個人防護。 野外采集標本時，應穿著顏色明亮的防護服，并將衣袖或褲管口扎緊以防蜱叮咬人體，且容易發現蜱的附著。一旦發現有蜱附著體表，應用鑷子夾取，不要用手直接摘除。野外作業或活動的人員可使用驅避劑或防蚊油噴涂皮膚，也可用硫化鉀代替防蚊油。 （四）標本運輸安全注意事項。 應參照《病原微生物實驗室生物安全管理條例》中的有關要求（B類）進行。 （五）在診療及標本的采集、包裝和實驗室檢測等過程中所產生的醫療廢物，應按照《醫療廢物管理條例》和《醫療衛生機構醫療廢物管理辦法》等相關規定處理。 附件4 人粒細胞無形體病專題調查方案 （試行） 為指導發生疫情的地區開展人粒細胞無形體病的調查，增進對該病病原學、傳播機制、危險因素及臨床診斷等的認識，為制訂相應的防控策略和措施提供科學依據，特制訂本方案。 一、調查目的 （一）了解人粒細胞無形體病疫區人群感染狀況及抗體水平。 （二）了解人粒細胞無形體病主要的潛在傳播媒介的種類、分布及帶菌狀況。 （三）了解人粒細胞無形體病常見的動物宿主種類、分布及帶菌狀況。 二、調查內容與方法 （一）血清流行病學調查。 1. 調查對象 （1）可能暴露者：與患者有類似暴露史的人員（暴露于有可疑野生動物或蜱的生境）。 （2）密切接觸者：與患者密切接觸者（參與救治的醫護人員、護理患者的家屬等）。 （3）一般人群：與患者無密切接觸，也無可疑生境暴露者。 2. 標本采集 對所有密切接觸者應采集雙份血清，間隔3-4周，另應采集可能暴露者及一般人群血清各30-50份。每次采集靜脈血5ml，分離血清送檢。血清標本的包裝、貯存及運送見《人粒細胞無形體病實驗室檢測方案（試行）》（附件3）。 3. 標本檢測 采集的標本應及時送有條件的省級疾病預防控制中心進行抗體檢測。如當地無檢測條件，應送中國疾病預防控制中心進行檢測。檢測方法及注意事項見《人粒細胞無形體病實驗室檢測方案（試行）》（附件3）。 （二）宿主動物調查。 根據流行病學調查的線索，確定是否進行宿主動物的調查。 1. 調查地點和時間 在病例可能感染的地點，或根據當地的地理景觀，選擇宿主動物調查的地點。調查時間可選擇在疫情發生后或宿主動物活動高峰季節。 2. 捕獲方法 （1）居民區采用籠夜法。在鼠類經常出沒的場所，于傍晚時在每15m2的房間放置鼠籠一個，并做好標記。誘餌用花生米或油條、油餅等（同一地區應選用同一種誘餌）。次日清晨取回鼠籠，將捕獲鼠的鼠籠放入布鼠袋內，系緊袋口，做好記錄，并編號。 （2）野外采用夾（籠）夜法。在有鼠活動的場所，于傍晚時布放鼠夾（籠），夾（籠）的行距應在30m以上，夾（籠）間距為5m，并做好標記。誘餌應統一。次日清晨取回夾（籠），將捕獲鼠放入布鼠袋內，系緊袋口，做好標記，并編號。如捕白天活動的鼠，采用夾（籠）日法。 （3）鼠類以外的其它野生宿主動物（如野兔等）可通過有關渠道獲取。 3. 標本處理 （1）采集動物血標本待檢。 （2）解剖前，將所捕宿主動物（如鼠等）置于密閉容器內，用乙醚深度麻醉。將動物（鼠）置于白瓷盤中，先用鑷子夾取盤中和動物（鼠）體表的寄生物，如蜱、螨、蚤等，寄生物按鼠只分別置入盛有75％酒精的密閉容器中，并標記相應鼠只的編號；然后，采用無菌方法解剖動物（鼠），取其脾、肝、腎標本，置入相應編號的無菌凍存管內，于液氮罐內保存。無液氮罐保存條件的，應置－20℃環境保存。 上述標本送回實驗室后，應盡快檢測。否則，應置－80℃超低溫、或－20℃低溫冰箱內保存。 4．動物的分類、鑒定 參考《醫學動物鑒定手冊》等相關專業資料，鑒定宿主動物的種類、學名等。 5. 核酸檢測及病原分離 （1）采用PCR擴增動物血液標本的DNA，并測定核苷酸序列。 （2）有條件的實驗室應對陽性標本進行病原體分離。陽性病原分離物送中國疾病預防控制中心作進一步鑒定。 方法見附件3《人粒細胞無形體病實驗室檢測方案（試行）》。 6. 計算動物（鼠）種的構成、密度及其帶菌率。 （三）蜱的調查。 1. 調查地點和時間 在病例可能感染的地點，或根據當地的地理景觀選擇媒介蜱的調查地點。調查時間可選擇在疫情發生后，或蜱活動高峰季節。 2. 捕獲方法 （1）布旗法。用約1平方米大小的白絨布旗，在調查地段內定時進行拖蜱。拖蜱時，手持旗桿伸向一側，使布旗平鋪于草叢上，以等速緩步向前行走，每步行2米觀察一次，將附著于旗上的蜱撿入玻管內保存。每小時檢獲蜱數即為蜱密度，單位為只／布旗人工小時，每次捕蜱時間不少于1小時（如蜱密度單位采用只／布旗人工分鐘，每次捕蜱時間一般不少于30分鐘）。同時，檢查拖蜱者身體上是否附著有蜱，如有，將蜱撿入另一玻管內保存，以區別于布旗法捕獲的蜱。凡拖過蜱的地方，短時間內不應在原地重復調查。 （2）帶蜱指數調查法。用鼠籠在有蜱活動的地方捕捉活鼠，鼠體上蜱的采集可參照宿主動物體外寄生物采集方法進行。平均每只鼠體上的蜱數即為帶蜱指數，單位為只／鼠。家養動物或其它野生動物用適當方式制動固定后，可直接檢蜱，計算帶蜱指數。 3. 蜱的分類、鑒定 參考有關專業資料，對捕獲的蜱進行分類、鑒定、命名（學名）。若當地無法鑒定，可將采集到的雌、雄蜱各若干只置于75%乙醇溶液中保存，送中國疾病預防控制中心傳染病所鑒定。 4. 核酸檢測及病原分離 （1）采用PCR擴增蜱標本的DNA，并測定核苷酸序列。 （2）有條件的實驗室應對陽性蜱標本進行病原分離。陽性病原分離物送中國疾病預防控制中心作進一步鑒定。 方法見附件3《人粒細胞無形體病實驗室檢測方案（試行）》。 5. 計算蜱種的構成、總帶菌率及各種蜱的帶菌率。 三、資料的收集、管理和利用 （一）一般背景資料的收集。 收集當地的一般背景資料，如調查時當地的氣象資料（氣溫、降雨量、濕度、風力、風向等）、地理狀況（地理位置、地形、地貌、湖泊、河流、流域等）、人口統計學資料、生產及生活方式（農、牧業、狩獵等活動）、生活及衛生習慣、特殊風俗、社會經濟狀況以及其他相關資料等。 （二）專題調查相關資料的收集。 收集專題調查的相關資料，包括各種采樣（人體血清、宿主動物標本、媒介蜱）登記表、檢測登記表、檢測報告，以及各類專題調查（血清采集、宿主動物調查、媒介蜱調查）統計表等（見附表1-8）。 （三）資料的管理和利用。 現場調查結束后，應及時撰寫專題調查報告，上報上級疾控機構及同級衛生行政部門，并將專題調查的原始記錄、匯總整理資料、分析數據及調查報告等及時整理、歸檔。實驗室檢測工作結束后，應及時將檢測結果反饋給當地疾病預防控制機構，由當地疾病預防控制機構告知相關單位及被調查者。 附表1 血清標本采集登記表 采血時間： 地點： 編號 姓名 性別 年齡 職業 住址 蜱叮咬史 發病日期 發熱史 臨床診斷 采血日期 采集量 備注 送檢單位： 送檢人： 送檢日期： 附表2 血清標本嗜吞噬細胞無形體抗體檢測登記表 編號 姓名 采集時間 檢測時間 檢測方法 檢測項目及結果 備 注 送檢單位： 送檢人： 送檢日期： 附表3 嗜吞噬細胞無形體宿主動物標本采集登記表 編號 地點 鼠種 雌/雄 體外寄生蟲 標本種類 備 注 蜱 蚤 螨 捕鼠日期： 送檢單位： 送檢人： 送檢日期： 附表4 嗜吞噬細胞無形體宿主動物標本檢測登記表 編號 動物/臟器種類 檢測時間 檢驗項目及結果 備 注 16S rRNA groEL IgG抗體 送檢單位： 送檢人： 送檢日期： 附表5 嗜吞噬細胞無形體媒介蜱采集登記表（布旗法） 編號 捕獲日期 捕獲地點 來源 蜱種 備注 送檢單位： 送檢人： 送檢日期： 附表6 媒介蜱嗜吞噬細胞無形體檢測登記表 編號 捕獲日期 捕獲數量 捕獲地點 檢驗項目及結果 備 注 16S rRNA groEL 送檢單位： 送檢人： 送檢日期： 附表7 嗜吞噬細胞無形體宿主動物調查統計報表 時間： 地區： 調查時間 調查地點 感染率 總鼠密度 鼠種1 鼠種2 鼠種3 鼠種4 合計（總感染率） 送檢單位： 送檢人： 送檢日期： 附表8 媒介蜱帶菌調查統計報表 時間： 地區： 調查時間 調查地點 帶菌率 蜱種1 蜱種2 蜱種3 蜱種4 合計（總帶菌率） 送檢單位： 送檢人： 送檢日期： 衛生部辦公廳 2008年2月20日印發 校對：徐 敏